Biomarcadores são indicadores de efeitos ao risco ocupacional e ambiental em sistemas biológicos que podem ser mensurados nas células ou moléculas, possibilitando a averiguação de alterações na estrutura e função do DNA e proteínas. O ensaio cometa ou SCGE (Single cell gel eletrophoresis assay) estabeleceu-se como uma técnica muito útil para estudos envolvendo quebras e reparo de DNA. Em geral, as lesões detectadas são decorrentes de quebras simples e duplas na fita de DNA, eventos de reparo por excisão de bases incompletas, crosslinks DNA-DNA, DNA-proteínas, e formação de sítios álcali-lábeis, consideradas regiões vulneráveis para a atuação das enzimas de reparo. Os processos de reparo são convertidos em quebras de DNA, para remoção das bases oxidadas pelo processo de excisão de nucleotídeos. Portanto, o teste torna-se mais sensível através da utilização de enzimas bacterianas conhecidas como endonucleases de reparo que possibilitam detectar bases oxidadas de maneira específica, como a Formamidopirimidina DNA glicosilase (FPG), capaz de reconhecer bases púricas, principalmente 7,8-dihidro-8-oxo-deoxiguanosina (8-OHgua), a Endonuclease III (ENDO III), detecta pirimidinas oxidadas e a 8-hidroxiguanina DNA glicosilase (hOOG1), reconhece produtos 8-oxo-7,8-dihidroguanina (8oxo-G). Devido ao nosso grupo de pesquisa já fazer uso do SCGE em diferentes estudos, nosso objetivo foi adaptar às condições do nosso laboratório o método SCGE modificado (Collins, 2004; Molecular Biotechnology; 3: 249-261) usando enzimas ENDO III, FPG e hOGG1 em linhagem V79 (fibroblastos de hamster chinês) exposta ao peróxido de hidrogênio (H₂O₂). Assim, as células V79 foram plaqueadas em meio de cultura DMEM e tratadas com H₂O₂ durante 3 horas. Após o tratamento as células foram coletadas, tripsinizadas, homogeneizadas e pequenas alíquotas misturadas com gel de agarose. Em seguida as lâminas foram mantidas em solução de lise celular para a obtenção de nucleóides. Neste momento, algumas amostras foram reservadas para processos de lavagem em três repetições por 5 minutos com o tampão das enzimas FPG, ENDO III e hOOG1 enquanto que outras lâminas além deste processo também foram incubadas durante 30 minutos com ENDO III e hOOG1; e por 45 minutos com FPG, em câmara úmida a 37°C. Em continuidade, a eletroforese alcalina foi realizada. Depois, as lâminas sem tratamento enzimático, com tratamento enzimático + tampão de enzimas e apenas com tampão de enzimas, foram neutralizadas e fixadas em etanol absoluto, coradas com brometo de etídio e lidas em microscópio de fluorescência, onde foram capturadas imagens de células analisadas pelo software Comet Assay IV®. O parâmetro adotado no presente estudo foi porcentagem de fluorescência presente na cauda. Neste teste piloto as enzimas ENDOIII, FPG e hOGG1 se mostraram eficientes sobre os danos provocados por H₂O_{2 ,} uma vez queforam verificados aumento significativo de lesões em células tratadas com todas as enzimas, decorrentes dos processos de reparo ao agente indutor de danos oxidativos (H₂O₂), quando comparados as células que não receberam o tratamento enzimático (P<0,05, ANOVA). Assim, foi possível adaptar o método SCGE modificado para detecção de bases oxidadas, e através do estabelecimento da metodologia em nosso laboratório nossa perspectiva é usar o teste em estudos de ecogenotoxicologia e biomonitoramento humano.