Portal de Eventos da ULBRA., XXIV SALÃO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA E TECNOLÓGICA

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AVALIAÇÃO DA ANTIMUTAGENICIDADE DO ARTEPELIN C, IN VITRO, NO TESTE DE MICRONÚCLEOS COM BLOQUEIO DA CITOCINESE (CBMN)
Jordana Ariane Nunes da Rosa, Ana Paula de Souza, Mauricio Lehmann, Rafael Rodrigues Dihl

Última alteração: 06-09-2018

Resumo


 

Analises fitoquímicas identificaram o composto polifenólico Artepelin C (Art C - ácido 3,5-diprenil-4-hidroxicinâmico) como principal componente bioativo da própolis verde. Devido ao fato de apresentar importantes atividades biológicas, este composto vem sendo alvo de diferentes estudos. Avaliar a modulação de dano no DNA é de extrema importância, uma vez que, alguns compostos naturais podem atuar reduzindo ou removendo mutações espontâneas ou induzidas, propriedade conhecida como antimutagenicidade. Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito protetor do Artepelin C contra instabilidade cromossomal induzida por um mutágeno, utilizando o teste de micronúcleos com bloqueio da citocinese, CBMN. Para tanto, as células de glioblastoma humano (U-87MG) foram cultivadas em monocamadas em frascos de cultura de 25 cm² (TPP), contendo meio DMEM suplementado com 15% de soro fetal bovino e antibióticos, a 37°C em uma incubadora com 5% de CO2. A bleomicina (BLEO) causa danos oxidativos no DNA e, dessa forma, foi utilizada como agente indutor de danos. Na avaliação referente a antimutagenicidade as células foram semeadas em placas de cultura, incubadas por 24 horas com meio DMEM completo para então serem submetidas a três protocolos de tratamentos: pré- tratamento, onde as concentrações 3,9; 7,8; 15,6; 31,2 e 62,5 μM de ArtC foram administradas antes da BLEO; tratamento simultâneo, Co- tratamento com diferentes concentrações do ArtC e BLEO; pós tratamento, o ArtC foi administrado depois da BLEO. Após a realização dos tratamentos, as células foram lavadas com DPBS e tripsinizadas com 350 μL de tripsina, neutralizadas com 650 μL de DMEM completo e transferidos 100 – 150 μL da suspensão de células para citocentrífuga de bancada, sendo centrifugadas a 700 xg por 5 min. A coloração das lâminas foi realizada por panótico Instant Prov (Newprov®) e após a secagem das mesmas, a leitura foi realizada em microscopia óptica com aumento de 1000x, onde foram analisadas 1000 células binucleadas por concentração para os parâmetros de micronúcleos (MN), pontes nucleoplasmáticas (PN) e brotos nucleares (BR). Assim sendo, os resultados preliminares sugerem que o ArtC foi capaz de reduzir a frequência de micronúcleos em comparação a células expostas a BLEO, nos três protocolos de tratamento anteriormente citados, sugerindo que o Art C pode agir protegendo o DNA contra danos ou estimulando vias de reparo.


Palavras-chave


CBMN; BLEO; U-87MG; própolis verde.

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