A tuberculose é uma doença contagiosa que  se desenvolve em decorrência de uma infecção por Mycobacterium tuberculosis ou Bacilo de Koch (BK). Segundo o boletim epidemiológico do Ministério da Saúde de 2017, foram registrados 66.796 casos novos de tuberculose e 12.809 casos de retratamento da doença no ano de 2016. O diagnóstico laboratorial da tuberculose é baseado na baciloscopia e na cultura do bacilo (padrão ouro). A baciloscopia, apesar de ser simples e ter o resultado rápido, possui uma sensibilidade moderada, sendo necessário 10 mil bacilos/ml de expectoração para que o resultado seja considerado positivo. A cultura, apesar de mais sensível, é muito demorada (até 60 dias). Os atrasos no diagnóstico da tuberculose, propiciam a transmissão do bacilo na população e influenciam o prognóstico dos indivíduos adoecidos, podendo levar à ocorrência de resistência a drogas e à morte. As técnicas que utilizam a amplificação de DNA por reação em cadeia de polimerase (PCR) são descritas como as mais sensíveis para o diagnóstico de tuberculose. O estudo teve como objetivo detectar DNA de M. tuberculosis por PCR em tempo real diretamente de amostras clínicas de escarro. Foram utilizadas 30 amostras clínicas de escarro. Vinte delas, de pacientes com diagnóstico de TB confirmados por baciloscopia e cultura (10 positivas e 10 negativas). Dez amostras negativas utilizadas para padronizar a técnica, foram contaminadas com a cepa de referência de Mycobacterium bovis. Todas as amostras tiveram o DNA extraído pela mesma técnica e amplificados por PCR em tempo real através da detecção da sequência de inserção IS6110 marcadas (fluoróforo) SYBR^® Green. Para definir a sensibilidade analítica do teste, foi realizado o PCR com diluições seriadas de 1:10. O teste detectou o DNA de M. tuberculosis até o limite de detecção de 14 UFC com uma média de CT de 27 ciclos.  A curva padrão obteve uma eficiência de 96,15%. Todas as amostras positivas foram amplificadas e todas as 10 negativas não tiveram amplificação. Assim, a técnica mostrou ser promissora para uso na rotina laboratorial.