O objetivo do estudo foi testar a hipótese nula que fios ortodônticos estéticos não são citotóxicos para fibroblastos de ratos. Foram utilizados 120 segmentos de fios NiTi com 5mm de comprimento, de diferentes marcas (TP Orthodontics®-TP, American Orthodontics®-AMO, Orthotechnology®-ORTHO, Forestadent®-FORESTA e Eurodonto®-EURO) avaliadas nos períodos de 24h, 48h, 7 e 28 dias. Utilizou-se a cultura de fibroblastos de ratos (NIH/3T3) e avaliação  da viabilidade celular através do MTT test, e testes estatísticos de Kruskal-Wallis, Friedman e Mann-Whitney, p<0,05. Os resultados mostraram baixas médias de viabilidade celular, com diferença para o controle negativo (p<0,05), mostrando toxicidade celular; exceto para AMO, ORTHO e FORESTA em 7 dias e TP após 28 dias. Em 24h, todos os fios estéticos mostraram-se citotóxicos e semelhantes entre si (p>0,05), exceto o grupo TP e FORESTA, com as maiores médias de viabilidade celular. Após 48h e 7 dias, houve aumento nas médias, exceto para FORESTA, tanto que AMO, FORESTA  e ORTHO passaram a ser semelhantes ao controle negativo (p>0,05). Nos 28 dias, os grupos apresentaram redução nas médias de viabilidade celular com p>0,05, exceto ORTHO, com a menor média de todos os grupos, em todos os tempos. Concluiu-se que a hipótese nula foi parcialmente rejeitada, uma vez que os fios estéticos mostraram-se citotóxicos para fibroblastos de ratos na maioria dos tempos avaliados.