O objetivo deste estudo foi avaliar a influencia da pré-instrumentação realizada com instrumentos rotatórios PathFile na ocorrência do transporte apical em canais curvos instrumentados até #F3 e #F4 do sistema ProTaper Universal. Quarenta raízes mésio-vestibulares de molares superiores com curvatura entre 20 e 33° foram selecionadas. Após o preparo cervical, foram divididas, de forma randomizada, em dois grupos experimentais. No grupo 1 (n=20) utilizou-se a pré-instrumentação, até o CT, com PathFile #1, #2 e #3 seguido sistema ProTaper Universal. No grupo 2 (n=20) utilizou-se somente o sistema ProTaper Universal. A ocorrência do desvio apical foi avaliada, em milímetros, por meio da subtração radiográfica digital nos sentidos vestíbulo-palatino (VP) e mésio-distal (MD), sobrepondo as imagens do instrumento apical inicial com as imagens de #F3 (S1) e,#F3 sobre #F4 (S2). Os resultados foram analisados estatisticamente pelo Test Mann-Whitney ao nível de significância de 0,05%. A utilização do instrumento #F4 aumentou significativamente a incidência de desvios apicais em lateralidade observados no sentido VP (p=0,0111) e verticalmente nas projeções MD (p=0,0111) quanto VP (p=0,0027). A utilização dos instrumentos PathFile, não diminuiu a frequência de desvios apicais em lateralidade e verticais. A pré-instrumentação realizada com os instrumentos PathFile não influenciou na ocorrência do desvio apical, em canais curvos, instrumentados pelo sistema ProTaper Universal.