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Overjet acentuado (OA) impacta negativamente a qualidade de vida relacionada à saúde bucal e o tratamento é complexo e de alto custo, indicando a necessidade de estratégias preventivas. O objetivo do estudo foi investigar o impacto do aleitamento materno e do uso de chupeta na ocorrência de OA na adolescência. Uma coorte prospectiva foi conduzida do nascimento aos 12 anos de idade (n = 214) em São Leopoldo, sul do Brasil. Aleitamento materno e uso de chupeta foram registrados mês a mês no primeiro ano de vida e o overjet foi avaliado aos 12 anos de idade. Foi realizada análise de mediação causal baseada no desfecho contrafactual por meio de modelos de regressão paramétrica para quantificar os efeitos direto do aleitamento materno e o mediado pelo uso de chupeta sobre OA após ajuste para fatores de confusão. A prevalência de OA foi de 40% (IC 95% 34-46%), sendo significativamente maior dentre aqueles sem aleitamento materno (46,9% x 32,0%) e os que usavam chupeta (47,0% x 31,2%) aos 12 meses. Observou-se um efeito protetor total do aleitamento materno sobre OA (OR 0,51; IC 95% 0,27;0,96), dos quais 67,4% foram mediados pelo uso de chupeta (OR 0,64; IC 95% 0,47;0,90). O aleitamento materno reduziu diretamente a chance de OA em 20%, mas sem significância estatística (OR 0,80; IC 95% 0,40; 1,64).Concluiu-se que aleitamento materno protege contra overjet na adolescência por reduzir o uso de chupeta, demonstrando mais um benefício a longo prazo de aleitamento materno no primeiro ano de vida, reforçando a necessidade de apoio a esta prática por todos os profissionais de saúde.