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GENOTOXICIDADE E MUTAGENICIDADE IN VITRO DE AMOSTRAS DE ÁGUA DE ARROIOS SOB A INFLUÊNCIA DE DIFERENTES EFLUENTES ANTROPOGÊNICOS
Juliana Picinini, Renata Farias Oliveira, Ana Letícia Hilário Garcia, Dione Silva Corrêa, Juliana da Silva

Última alteração: 15-11-2021

Resumo


Efluentes domésticos, industriais e agrícolas podem conter diferentes substâncias químicas, que não são totalmente removidas após os tratamentos convencionais, afetando a qualidade da água dos corpos receptores (1). O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial citotóxico, genotóxico e mutagênico em células HepG2 de amostras de águas superficiais sob a influência de diferentes efluentes antropogênicos. As amostras foram coletadas nos arroios Esteio e Sapucaia (Rio Grande do Sul; Brasil). O Arroio Esteio recebe efluentes domésticos e deságua no Arroio Sapucaia, o qual recebe também efluentes industriais e de escoamento agrícola, e deságua no rio dos Sinos, fonte de abastecimento de água para mais de um milhão de pessoas. Foi realizada análise de elementos inorgânicos através da técnica de PIXE (2) e pesquisa de fármacos e cafeína por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (3). A citotoxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade das amostras foram avaliadas através dos ensaios de viabilidade celular (4,5), ensaio cometa (alcalino e modificado com enzimas) (6,7) e ensaio de micronúcleo em bloco de citocinese (8), respectivamente. Detectamos cafeína, dietiltoluamida e diferentes elementos inorgânicos que correspondem a elementos de efluentes domésticos e industriais e escoamento agrícola. Embora as amostras na concentração testada não fossem citotóxicas, todos os pontos de coleta induziram danos ao DNA. O ensaio cometa modificado com enzima sugere que tal dano é devido à lesões oxidativas. No entanto, tais danos resultam de uma mistura complexa de diferentes compostos, incluindo metais pesados, sendo difícil identificar individualmente quais substâncias podem ser responsáveis ​​pelos efeitos adversos associados à exposição a agentes ambientais (1). Porém, amostras do Arroio Sapucaia coletadas em áreas de influência industrial apresentaram maiores níveis de elementos inorgânicos, demonstrando o impacto ambiental causado por tais efluentes neste arroio. Apesar disso, observa-se que as contribuições urbanas e industriais tiveram efeito semelhante nas células avaliadas. Esses dados demonstram a necessidade de realizar o biomonitoramento das águas superficiais sob influência antropogênica, principalmente aquelas que deságuam em rios que são fonte de abastecimento público.

Referências

1. Batista NJC, Melo AA de C, de Oliveira MG, Medeiros ECN, Machado JL, Evangelista SR, et al. Genotoxic and mutagenic evaluation of water samples from a river under the influence of different anthropogenic activities. Chemosphere. 2016;164:134–41.

2. Johansson SAE, Campbell JL, Malmqvist KG. Particle-Induced X-Ray Emission Spectrometry (PIXE). 1st ed. Johansson SAE, Johansson SAE, Malmqvist KG, editors. Nova Yorque: Wiley-Interscience; 1995.

3. Jank L, Hoff RB, da Costa FJ, Pizzolato TM. Simultaneous determination of eight antibiotics from distinct classes in surface and wastewater samples by solid-phase extraction and high-performance liquid chromatography-electrospray ionisation mass spectrometry. Int J Environ Anal Chem. 2014;94(10):1013–37.

4. Mosmann T. Rapid Colorimetric Assay for Cellular Growth and Survival: Application to Proliferation and Cytotoxicity Assays. J lmmunological Methods. 1983;65:55–63.

5. ISO, ISO 10993-5:2009 - Biological evaluation of medical devices — Part 5: Tests for in vitro cytotoxicity, (2009) 34. https://www.iso.org/standard/36406.html (accessed June 3, 2021).

 

6. Da Silva J, De Freitas TRO, Heuser V, Marinho JR, Erdtmann B. Genotoxicity biomonitoring in coal regions using wild rodent Ctenomys torquatus by Comet assay and micronucleus test. Environ Mol Mutagen. 2000;35(4):270–8.

7. Tice RR, Agurell E, Anderson D, Burlinson B, Hartmann A, Kobayashi H, et al. Single Cell Gel / Comet Assay : Guidelines for In Vitro and In Vivo Genetic Toxicology Testing. Environ Mol Mutagen. 2000;35:206–21.

8. Fenech M. Cytokinesis-block micronucleus cytome assay. Nat Protoc. 2007;2(5):1084–104.


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